Як виміряти ріст бактерій

Posted on
Автор: John Stephens
Дата Створення: 24 Січень 2021
Дата Оновлення: 1 Липня 2024
Anonim
Сравнение Размеров: Монстры
Відеоролик: Сравнение Размеров: Монстры

Зміст

У цій статті: Спостереження за бактеріями безпосередньо. Вимірювання біомаси. Процедура за допомогою турбідиметрії8 Посилання

Існує кілька способів вимірювання росту бактерій, а деякі реалізувати складніше, ніж інші. Найпростіші зазвичай використовуються і дають відносно точні результати, за умови, що вони суворі під час вимірювань. Найпоширеніші методи - спостереження та підрахунок бактерій, вимірювання біомаси та сухої біомаси та турбідиметрії. Ваша шкільна лабораторія повинна мати обладнання, необхідне для принаймні одного з цих методів.


етапи

Спосіб 1 Спостереження за бактеріями безпосередньо



  1. Підготуйте обладнання. Крім того, що зазвичай є у всіх лабораторіях з біології, вам знадобляться деякі конкретні предмети. Переконайтесь, що у вас під рукою всі прилади та контейнери, тому вам не доведеться повертатися туди-сюди в шафу, де зберігається обладнання. Подумайте заздалегідь, що ви будете робити, щоб знати, чим будете користуватися на кожному етапі. Також вам доведеться знати деякі ключові терміни.
    • Отримайте гемацитометр. Це лезо з камерами нумерації, яке пов'язане з мікроскопом. Це дуже простий інструмент для налаштування та використання. Ви можете знайти деякі з постачальників, що спеціалізуються на обладнанні для шкіл та науково-дослідних лабораторій. Зазвичай надається посібник користувача.
    • Візьміть чашку Петрі. Це невелика кругла неглибока ємність, де можна спостерігати бактерії.
    • Термін "культура" відноситься до мікроорганізму, який штучно розмножується як частина наукового експерименту.
    • "Бульйон культури" - це середовище, в якому культура розвиватиметься.



  2. Використовуйте чашку Петрі. Покладіть бактерії в короб і спостерігайте за цим під мікроскопом. Ви також можете розмістити його безпосередньо на слайді. Потім підраховують кількість присутніх бактеріальних клітин.


  3. Переконайтеся, що у вас правильна концентрація. Якщо бактерій занадто багато, вони перекриються, і ви не зможете їх правильно порахувати. Якщо це так, розведіть культуру, змішавши її з невеликою кількістю бульйону. Якщо їх занадто мало, результат не буде суттєвим. Потім потрібно процідити відвар, щоб збільшити концентрацію.


  4. Порахуйте бактерії. Останній крок - просто порахувати. Подивіться під мікроскоп підрахункові камери та відзначте кількість осередків, які ви бачите. Порівняйте результат з іншими подібними переживаннями.

Спосіб 2 Вимірювання біомаси




  1. Перевірте, чи є у вас необхідні інструменти. Цей спосіб повільний у здійсненні та передбачає використання дорогого обладнання. Якщо ви не миєте його, використовуйте іншу техніку. З іншого боку, якщо у вашій лабораторії є правильні інструменти, вимірювання біомаси та сухої маси є ідеальним, оскільки воно дає точні результати. Вам потрібно:
    • гідравлічна піч з примусовою конвекцією,
    • алюмінієва вага,
    • кілька колб Ерленмайєра,
    • центрифугу або лабораторну систему фільтрації.


  2. Перевірте, чи врожай знаходиться в колбі Ерленмайєра. Якщо це не так, налийте його. На цій стадії експерименту бактерії все ще знаходяться в бульйоні культури. Вони будуть відокремлені пізніше.


  3. Обсушіть вагу. Для цього поставте його в духовку. Можна також використовувати мембранний фільтр з ацетатом целюлози діаметром 47 мм із порами 0,45 мкм. Який би інструмент не використовувався, точно виміряйте його масу, щоб її можна було відняти від результатів, отриманих при розміщенні на ній урожаю.


  4. Mix. Перемішайте лерленмейер, щоб культура була однорідною. Дійсно, через гравітацію клітини, природно, мають тенденцію опускатися на дно контейнера. Тож вам доведеться трішки струсити, які розподіляються рівномірно, і щоб ваш зразок був більш репрезентативним.


  5. Центрифуга. За допомогою центрифуги відокремте бактерії від культурального бульйону. Цей пристрій використовується для обертання контейнера та противаги на дуже високій швидкості. Тече бульйон, який зберігає лише живу речовину. Для отримання додаткової інформації ви знайдете інформацію про те, як користуватися центрифугою в Інтернеті.


  6. Дістати тісто. Опустити його на сковороду для зважування. Ви можете кинути культурний бульйон, він вам більше не знадобиться, але тримайте лерленмейер під рукою.


  7. Промийте центрифугу. Налийте воду для полоскання на вагу, крім бактеріальних клітин. Результат, отриманий для всього, дає вам біомасу.


  8. Знайдіть суху масу. Щоб знати суху біомасу вашого зразка, помістіть вагову каструлю в духовку, встановлену при 100 ° C, на період від 6 до 24 годин, відповідно до інструкцій, що постачаються з вашим пристроєм. Будьте обережні, щоб не перевищувати цю температуру, щоб уникнути опіку бактерій. Потім все зважте, потім відніміть масу лотка.

Спосіб 3 Виконайте турбідиметрію



  1. Підготуйте своє обладнання. Вам знадобиться джерело світла та спектрофотометр, прилад, знайдений у більшості наукових лабораторій. Зверніться до посібника користувача, що постачається, оскільки кожна модель має власну роботу. Цей метод є одним з найбільш часто використовуваних для вимірювання росту бактерій, оскільки для нього потрібні лише недорогі та прості у використанні інструменти.


  2. Внесіть світло в культуру. Помутніння використовується для оцінки вмісту рідини у частинках, її кількість визначає, чи є вона більш-менш хмарна. Результат, який ви отримаєте від цього вимірювання, буде надано в NTU (або Нефелометричні одиниці помутніння). Для точного вимірювання каламутності зразка може знадобитися здійснити калібрування пристрою.


  3. Робіть замітки. Помутніння - кількість бактерій у зразку. Спектрофотометр також дозволить вам знати прохідність розчину (% T), значення якого обернено пропорційно значенню помутніння. Потім порівняйте отримані результати на різних зразках для вимірювання росту бактерій.